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摘要
本发明公开了一种基于改造核糖体结合位点提高ε-己内酯产量的方法。该方法以pRSFDuet为出发载体,将chmo基因和RBS-(21)-adh序列插入空载pRSFDuet中,得到pRSF-RBS-(10)-CHMO-RBS-(21)-ADH载体；根据核糖体结合位点的特征,设计新的CHMO RBS序列,构建含CHMO RBS序列的重组菌株,并诱导重组菌株表达ADH蛋白和CHMO蛋白后,收集活细胞进行静息催化,实现环己醇被催化高产ε-己内酯。本发明提供的方法中得到的重组菌株能在16h内完全催化60mM环己醇,得到43.98mM的ε-己内酯。该方法高效,周期短,节约资源,为工业高产ε-己内酯提供了可能性。
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