沙地葡萄茎痘相关病毒在‘阳光玫瑰’葡萄树不同物候期和不同部位的变化规律

作者：李美璇; 张向昆; 王莉; 乔月莲; 师校欣; 杜国强^*

来源：中国农业科学, 2023, 56(21): 4234-4244.

• ‘阳光玫瑰’葡萄
• 沙地葡萄茎痘相关病毒
• 实时荧光定量PCR
• 病毒检出率
• 基因表达量

【背景】沙地葡萄茎痘相关病毒（grapevine rupestris stem pitting associated virus,GRSPaV）是皱木复合病中最常见的一种病毒，主要通过无性繁殖传播，灵敏的检测技术和培育无病毒植株是预防GRSPaV危害的关键。【目的】建立GRSPaV检测体系，确定适宜样品采集时期及部位，为病毒检测和无病毒材料培育及样品采集提供参考。【方法】建立基于AugeGreen染料法和外壳蛋白（coat protein,CP）基因区域设计引物的RT-qPCR检测方法，对携带GRSPaV的‘阳光玫瑰’葡萄树地上部不同物候期、不同部位的样品进行GRSPaV检出率及基因表达量分析。【结果】以GRS q CP1为引物的GRSPaV RT-qPCR检测方法灵敏度较RT-PCR高10倍。GRSPaV在萌芽期、新梢生长期和花期的检出率均为100%，果实膨大期为91.7%；成熟卷须为94.4%，成龄叶片、成龄叶柄和幼嫩枝条均为100%。检测为阴性的样品均为幼嫩部位。GRSPaV CP基因表达量在花期幼嫩卷须中最高，其次为花期成龄叶片；成龄叶中表达量在果实膨大期至成熟期均为同物候期内表达量最高部位；当年冬芽的萌芽期及二次枝的新梢生长期表达量均较低。【结论】‘阳光玫瑰’葡萄GRSPaV检出率和GRSPaV CP基因表达量随物候期进程表现差异，检出率在萌芽期至花期最高，果实成熟期最低；GRSPaV CP基因表达量在花期最高。综合检出率及表达量因素，花期成龄叶适合作为GRSPaV病毒检测样品；果实膨大期至成熟期当年冬芽及萌发的二次枝适合作为脱除病毒材料。

• 单位
  河北农业大学