基因捕获技术在肝癌侵袭和迁移相关基因筛选中的应用

作者：熊冬梅; 朱士胜; 汤华

来源：重庆医科大学学报, 2018, 43(01): 42-46.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.001183

• 基因捕获技术
• 肝癌
• 侵袭和迁移
• LINC00052

目的:用基因捕获技术在肝癌细胞SMMC7721细胞中寻找与肝癌侵袭和迁移相关的基因。方法:首先,将p U21质粒转染到肝癌细胞SMMC7721细胞,用G418筛选出单克隆稳定细胞系;其次,采用Transwell小室实验和划痕实验,检测这些单克隆细胞侵袭和迁移能力的变化;最后,用5’-Full RACE实验、T克隆及基因测序检测这些细胞系中被p U21质粒捕获的基因。结果:成功获得了约300株稳定转染p U21质粒的单克隆细胞系,得到了约30株侵袭和迁移能力增强的细胞株和约40株侵袭和迁移能力减弱的细胞株。通过5’-Full RACE实验、T克隆及基因测序检测,证明了在A554细胞系中,被p U21质粒捕获的基因是long inter-genic non-protein coding RNA 52(LINC00052)。结论:应用基因捕获技术筛选肝癌侵袭和迁移相关基因是可行的。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医药高等专科学校