摘要
目的研究微小RNA(microRNA,miR)-140-3p靶向凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associatal X protein, BAX)减轻白细胞介素(interleukin, IL)-1β诱导软骨细胞损伤的作用及机制。方法培养大鼠骨关节软骨细胞ATDC5,采用不同浓度IL-1β(0、1、5、10ng/mL)处理后检测miR-140-3p、BAX的表达水平;10 ng/mL IL-1β处理的同时转染阴性对照(NC)miR或miR-140-3p、感染NC腺病毒或BAX腺病毒,检测细胞存活率、凋亡率、miR-140-3p、BAX及Cleaved caspase-3表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p靶向BAX的作用。结果不同浓度IL-1β处理的ATDC5细胞中miR-140-3p表达降低、BAX表达增加(P<0.05);miR-NC+IL-1β组的存活率、miR-140-3p表达水平低于miR-NC组,凋亡率、BAX及Cleaved caspase-3表达水平高于miR-NC组(P<0.05);miR-140+IL-1β组的存活率、miR-140-3p表达水平高于miR-NC+IL-1β组,凋亡率、BAX及Cleaved caspase-3表达水平低于miR-NC+IL-1β组(P<0.05);miR-140+Ad-BAX+IL-1β组的存活率低于miR-140+Ad-NC+IL-1β组,凋亡率、BAX及Cleaved caspase-3表达水平高于miR-140+Ad-NC+IL-1β组(P<0.05)。结论在IL-1β诱导软骨细胞损伤模型中miR-140-3p起到保护作用,靶向BAX并抑制细胞凋亡是相关的分子机制。
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单位秦皇岛市第一医院