高灵敏化学发光法体外HBV转录与复制水平的检测体系

作者：何芳; 唐红; 刘丽; 刘凤君; 王甦; 周陶友; 赵连三; 刘聪

来源：世界华人消化杂志, 2006, (14): 1346-1351.

• 乙型肝炎病毒
• 转录
• 复制
• 化学发光法
• 检测 Hepatitis B virus
• Transcription
• Replication
• Chemiluminescent
• Detection

目的:建立一套稳定的化学发光法体外HBV 转录与复制水平检测体系．方法:将人肝癌细胞株HepG2和可产生复制型HBV颗粒的HepG2．2．15细胞培养3 d,收集细胞均分为两份,分别抽提细胞总RNA 和HBV复制中间体DNA．以地高辛标记的 HBV重组质粒pHBV4．1作为探针,分别进行 Northern及Southern吸印杂交,以化学发光法检测杂交结果．将pHBV4．1以对数级差稀释后分别点样于尼龙膜用作内标,同时进行杂交及检测．结果:HepG2．2．15细胞提取物中检测出较强的HBV转录产物:3．5 kb,2．4／2．1 kb HBV mRNA的信号,及较强的HBV复制产物:HBV 复制...

• 单位
  四川大学华西医院; 四川大学; 生物治疗国家重点实验室