类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞分子伴侣介导自噬增强与病情的相关性

作者：邵鑫; 蒋先虹; 王瑞; 刘福^*

来源：中华临床免疫和变态反应杂志, 2022, 16(01): 3-8.

DOI：10.3969/j.issn.1673-8705.2022.01.002

• 类风湿关节炎
• 分子伴侣介导自噬
• Hsc70
• LAMP2A

目的 检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLS)分子伴侣介导自噬(chaperone-mediated autophagy, CMA)水平，探究其与RA病情发生发展的关系。方法 从手术室中收取8例RA患者膝关节滑膜组织，培养原代滑膜细胞；同期收取8例骨关节炎(osteoarthritis, OA)患者膝关节滑膜组织，培养骨关节炎滑膜成纤维细胞(osteoarthritis fibroblast-like synoviocytes, OA-FLS)作为对照。采用RT-qPCR检测RA-FLS与OA-FLS中CMA标志性因子Hsc70、LAMP2A mRNA水平；Western blot法检测两组细胞中Hsc70、LAMP2A蛋白水平。采用免疫荧光细胞化学染色检测RA-FLS中Hsc70、LAMP2A蛋白及共定位表达。采用Pearson法分析Hsc70、LAMP2A蛋白与RA患者临床指标DAS28、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、类风湿因子(rheumatoid factor, RF)的相关性。结果 RA-FLS组Hsc70与LAMP2A mRNA(1.05±0.15和1.01±0.06)和蛋白水平(1.02±0.08和1.07±0.03)均明显高于OA-FLS(分别为0.51±0.10和0.63±0.08、0.78±0.06和0.61±0.08)对照组(P<0.05);免疫荧光结果显示，RA-FLS中代表Hsc70蛋白的红色荧光和代表LAMP2A蛋白的绿色荧光明显更强，红绿荧光融合后的黄色荧光斑点也显著高于对照组。Pearson相关性分析结果显示，Hsc70蛋白水平与RA患者DAS28得分呈正相关(r=0.775 6),LAMP2A蛋白水平与RA患者DAS28得分、ESR呈正相关(分别r=0.750 7、r=0.779 0)。结论 RA患者Hsc70、LAMP2A表达上调，CMA途径被激活，且与RA患者的病情活动度呈正相关。

• 单位
  乐山市人民医院; 川北医学院附属医院