大麻素受体2激动剂AM1241抑制大鼠脊髓损伤后纤维瘢痕形成

作者：凌成明; 储卫华; 袁继超; 陈欣; 刘静静; 张洪燕; 林江凯^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(10): 991-1000.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202202141

• 大麻素受体2/CBR2
• 大麻素受体2激动剂
• 脊髓损伤
• 纤维瘢痕
• 巨噬细胞极化

目的 探讨AM1241对大鼠脊髓损伤后纤维瘢痕形成的作用及其机制。方法 选取雌性6～8周龄Sprague-Dawley大鼠144只，分为4组：(1)假手术组(n=24)只移除椎板以暴露硬脊膜，不切开硬脊膜，术后给予生理盐水3 mL/kg;(2)载体组(n=40)建立大鼠脊髓背侧半切损伤模型，术后给予生理盐水3 mL/kg;(3)AM1241组(n=40)在载体组基础上给予大麻素受体2(cannabinoid receptor 2,CBR2)激动剂(AM1241,3 mg/kg)治疗；(4)AM1241+AM630组(n=40)在术后AM1241治疗前30 min给予CBR2拮抗剂(AM630,3 mg/kg)。各组药物均腹腔注射，1次/d,连续14 d。采用免疫荧光染色、Western blot、ELISA等方法评估AM1241对大鼠纤维瘢痕形成的抑制作用，同时采用行为学、电生理检测AM1241对大鼠神经功能的影响。结果 与载体组比较，AM1241组大鼠脊髓损伤后，主要纤维瘢痕成分的表达降低，脊髓损伤后，纤维瘢痕面积减少，给予CBR2拮抗剂AM630后逆转了上述现象，差异均有统计学意义(P<0.05)。tubulinβⅢ免疫荧光染色、行为学评估、电生理实验结果显示：AM1241组促进了脊髓神经元细胞的存活，改善了脊髓损伤后的神经功能，包括Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分[载体组(15.38±0.38)vs AM1241组(18.38±0.50)vs AM1241+AM630组(15.50±0.33),P<0.05]、斜板实验角度[载体组(54.25±1.25)°vs AM1241组(64.25±1.05)°vs AM1241+AM630组(54.75±0.49)°,P<0.05]等；ELISA实验结果显示：AM1241组抑制M1型巨噬细胞标记物iNOS、TNF-α、IL-1β的表达(P<0.05),增强M2型巨噬细胞标记物CD206、Arg-1的表达(P<0.05),降低促纤维化因子TGF-β1的表达(P<0.01);而应用CBR2拮抗剂AM630后逆转了上述作用。结论 刺激大鼠CBR2能减少脊髓损伤后纤维瘢痕、改善神经功能，这一作用可能是通过影响巨噬细胞极化来实现的。

• 单位
  第三军医大学; 第一附属医院神经外科; 第一附属医院神经内科; 中国人民解放军陆军军医大学