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摘要
目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-365在胆囊癌中的表达及其对肿瘤进展的影响。方法选取2019年6月到2021年6月商丘市第一人民医院收治的53例胆囊癌患者的肿瘤组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析胆囊癌组织和癌旁组织中miR-365表达水平。以人胆囊癌细胞株GBC-SD为研究对象, 转染对照miRNA和miR-365模拟物, 建立对照组和观察组细胞系, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞增殖活力, 采用体外移植瘤实验分析细胞体内增殖能力, 采用流式细胞术分析细胞凋亡比例, 采用Transwell分析细胞的迁移能力, 采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞上皮-间充质转化能力和凋亡相关蛋白表达。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-365表达水平(0.92±0.12)明显高于胆囊癌组织(0.54±0.16), 差异有统计学意义(t=14.001, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.90±0.12)明显高于观察组(1.26±0.17), 差异有统计学意义(t=7.737, P<0.05)。对照组细胞肿瘤体积[(666.33±66.97) mm3]明显高于观察组[(399.17±46.23) mm3], 差异有统计学意义(t=8.041, P<0.05)。对照组细胞肿瘤质量[(3.56±0.45) g]明显高于观察组[(2.01±0.11) g], 差异有统计学意义(t=8.236, P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(3.48±0.53)%]明显低于观察组[(25.25±3.51)%], 差异有统计学意义(t=15.080, P<0.05)。Transwell结果显示, 对照组细胞迁移数量[(89.67±8.29)个]明显低于观察组[(42.33±9.11)%], 差异有统计学意义(t=9.412, P<0.05)。对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平(1.08±0.08)明显低于观察组(1.99±0.15), 差异有统计学意义(t=12.850, P<0.05)。对照组细胞角形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平(1.08±0.07、1.50±0.11)明显高于观察组(0.71±0.05、0.69±0.12), 差异有统计学意义(t=10.420、11.880, P<0.05)。对照组细胞第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)蛋白和FasL蛋白表达水平(0.60±0.09、0.78±0.13)明显低于观察组(0.97±0.12、1.75±0.0.13), 差异有统计学意义(t=6.065、13.190, P<0.05)。结论 miR-365在胆囊癌中呈低表达, 作为抑癌基因参与了胆囊癌细胞的增殖、凋亡、迁移和上皮-间充质转化等细胞生物学行为。
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单位徐州医科大学; 商丘市第一人民医院
