Circ-ZNF609通过miR-224-5p调控食管癌细胞生物学特性的作用机制

作者：连利霞; 朱琰琰; 吴广银; 牛坡; 高未华

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(07): 1645-1650.

• Circ-ZNF609
• miR-224-5p
• 食管癌
• 增殖
• 凋亡

目的 探讨Circ-ZNF609对食管癌细胞生物学特性影响及作用机制。方法 体外培养正常食管内皮细胞NEC与食管癌细胞系Eca-109、KYSE30、KYSE-450,实验分组：NC(空白)组、si-NC(转染si-NC)组、si-Circ-ZNF609(转染si-Circ-ZNF609)组、miR-NC(转染miR-NC)组、miR-224-5p(转染miR-224-5p)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-NC(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-NC)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-224-5p(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-224-5p)组；采用实时荧光(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测Circ-ZNF609、miR-224-5p表达量；采用Western印迹检测细胞周期素蛋白(Cyclin)D1、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、β-catenin蛋白表达；采用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞活力、细胞周期和凋亡率；双荧光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。结果 与正常食管内皮细胞NEC比较，食管癌细胞Eca-109、KYSE30、KYSE-450中Circ-ZNF609表达水平明显升高，miR-224-5p表达水平明显降低(P<0.05);与si-NC组比较，si-Circ-ZNF609组细胞活力与S期细胞比例明显降低(P<0.05),G2/M期细胞明显比例升高(P<0.05),CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低，凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与miR-NC组比较，miR-224-5p组细胞活力与S期细胞比例明显降低，G2/M期细胞比例明显升高，CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低，凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白产生明显增加(P<0.05);Circ-ZNF609可靶向调控miR-224-5p;抑制miR-224-5p表达可逆转Circ-ZNF609沉默对食管癌细胞生物学行为的作用。结论 干扰Circ-ZNF609能够通过促进miR-224-5p表达而调控食管癌细胞生物学特性，此影响可能涉及Wnt/β-catenin信号通路的失活。

• 单位
  河南省人民医院; 郑州大学; 河南大学