基于HIF-1α/自噬途径探讨二氯化钴调控3T3-L1脂肪细胞炎症反应及胰岛素抵抗的机制

作者：岳欣欣; 付洋; 李怡然; 尹晓燕; 于飞; 傅全威^*

来源：中国比较医学杂志, 2023, 33(11): 33-38.

• HIF-1α
• 自噬
• 3T3-L1细胞
• 炎症反应
• 胰岛素抵抗

目的 探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl2 )调控3T3-L1脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反应和胰岛素抵抗的机制。方法 常规培养和诱导分化3T3-L1脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞，CoCl2作为低氧诱导剂在不同时间、不同浓度条件下干预成熟的脂肪细胞，确认CoCl2干预脂肪细胞自噬活性的最佳时间和浓度，随后根据此时间和浓度分组，分为0 h(对照组)、12 h、24 h、48 h CoCl2处理组，收集细胞样本进行相关指标测定。MTT法评价各组细胞存活情况；Western blot分析各组细胞HIF-1α及其下游蛋白葡萄糖转运蛋白Glut-1、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达情况；免疫荧光法检测各组细胞的自噬水平；ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6分泌情况。结果 150μmol/L CoCl2是调控3T3-L1脂肪细胞自噬水平的最佳干预浓度；150μmol/L CoCl2干预成熟的脂肪细胞24 h时，自噬活性水平增高，细胞存活率无显著的减低，脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1蛋白的表达水平也显著升高，但炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平无明显增加；48 h时自噬水平减低，细胞存活率出现显著减低，脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1蛋白的表达水平减低，炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平出现增加趋势。结论 150μmol/L CoCl2可以调控脂肪细胞自噬水平增加，自噬水平的增加以依赖HIF-1α的方式活化，从而使自噬发挥保护脂肪细胞的作用使其免受炎症损伤和改善脂肪细胞胰岛素抵抗。

• 单位
  辽宁何氏医学院; 东莞康华医院