大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的培养、鉴定及体外特性初步研究

作者：符跃强; 蒋静; 陈娟; 陈聪; 方芳; 卢仲毅; 许峰

来源：重庆医学, 2010, 39(15): 1988-1990.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8348.2010.15.021

• 肺泡Ⅱ型上皮细胞
• 细胞培养
• 改良巴氏染色
• 板层小体 alveolar type Ⅱ epithelial cells
• cell culture
• modified papanicolaou Staining
• lamellar body

目的建立成年大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ细胞)分离、纯化、原代培养和鉴定的技术方法 ,并观察其体外生长特性及SP-A表达情况。方法将0.08%胰蛋白酶消化液从气管注入肺组织,消化分离ATⅡ细胞。将大鼠IgG包被的培养皿免疫吸附纯化后,进行原代培养。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况,透射电镜(TEM)鉴定细胞,改良巴式染色法鉴定并计算细胞纯度,MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测细胞表达SP-A动态变化。结果细胞产量约为2.2×107个/只大鼠。电镜下观察到ATⅡ细胞特征性结构——板层小体;纯度大于90%。体外培养36～72h时细胞生长良好,细胞质内有较多颗粒;96h后细胞呈...

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 南京医科大学附属南京儿童医院