小干扰RNA介导雌激素β基因沉默对肺腺癌LTEP-a2细胞凋亡的影响

作者：卢珠明^*; 伍硕允; 王庆涛; 李宇明; 叶敏; 林志潮; 沈涛; 段楚骁; 张东熙

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(10): 1711-1714.

• 肺癌
• 性激素
• RNA干扰
• 雌激素β基因
• 脱噬作用

目的观察小干扰RNA(siRNA)介导雌激素β(ERβ)基因沉默对ERβ高表达的肺腺癌LTEP-a2细胞凋亡作用及17-β雌二醇敏感性。方法合成针对ERβ的siRNA, 对生长期的ERβ高表达的LTEP-a2细胞进行转染, 48 h后, 收集细胞随机分为阴性对照组、空白对照组和转染组。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ERβ mRNA的表达, Western blot法检测ERβ蛋白的表达。噻唑蓝(MTT)比色法检测17-β雌二醇培养的转染细胞的存活, 计算各组细胞的半数抑制率(IC50), 流式细胞仪检测转染细胞的凋亡。结果阴性对照组、空白对照组和转染组ERβ mRNA的表达强度分别为0.32±0.06、0.28±0.05和0.05±0.02。转染siRNA组ERβ mRNA表达明显低于阴性对照组(P=0.032)及空白对照组(P=0.015)。阴性对照组、空白对照组和转染组ERβ蛋白的表达强度分别为0.18±0.04、0.28±0.03和0.06±0.01。转染siRNA组ERβ蛋白表达低于阴性对照组(P=0.038)及空白对照组(P=0.000);不同浓度的17-β雌二醇干预后, ERβ-siRNA转染组细胞与阴性对照组及空白对照组比较存活率显著下降。阴性对照组、空白对照组和转染组IC50值分别为(28.34±4.32)%、(27.66±3.04)%和(8.34±1.22)%, 雌二醇干预对LTEP-a2细胞生长与阴性对照组及空白对照组比较, 转染组生长明显抑制;转染组、阴性对照组与空白对照组细胞凋亡率分别为(35.68±1.58)%、(3.55±0.33)%和(1.30±1.45)%, 转染siRNA组在雌二醇干预后LTEP-a2细胞的凋亡率显著增加, 转染组与阴性对照组与空白对照组比较, 差异有统计学意义。结论 siRNA介导的ERβ基因沉默可以抑制雌激素干预后肺癌细胞的增殖siRNA介导的ERβ基因沉默, 可以增加雌激素干预后肺癌细胞的凋亡, ERβ可能在筛选女性性激素依赖性非小细胞肺癌中发挥重要作用。

• 单位
  中山大学; 江门市中心医院