摘要

选用玉米粉、豆饼粉、KH2PO4及Na2HPO4为基础配方,通过单因素实验对枯草芽孢杆菌发酵产中性蛋白酶的发酵培养基、培养条件、发酵条件进行优化。确定了优化的发酵培养基为:20g·L-1甘油,30g·L-1豆饼粉,2mmol·L-1氯化钙,0.3g·L-1 KH2PO4,4g·L-1 Na2HPO4;优化的培养条件为:培养温度30℃,接种量5%。调控发酵培养基pH值7.0控制发酵,发酵24h酶活达到7 344U·mL-1。进行流加甘油实验,培养温度30℃,发酵过程控制pH值7.0,调整转速和通风量控制溶氧30%~35%,接种量5%,经过30h发酵,酶活达到10 654U·mL-1,较未补料提高了45%。