坎地沙坦抑制内毒素诱导的VSMCs炎症因子释放的作用研究

作者：于新辉; 闫超; 孟哲

来源：重庆医学, 2014, 43(36): 4860-4863.

• 坎地沙坦
• 血管平滑肌细胞
• Toll样受体-4
• 白细胞介素-1β
• 肿瘤坏死因子-α

目的研究坎地沙坦对内毒素(LPS)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)炎症因子释放的影响,探讨Toll样受体4(TLR4)介导的信号通路在这一过程中的作用。方法原代培养大鼠VSMCs,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度坎地沙坦对VSMCs活性的影响。将细胞分为5组:A组(对照组)、B组(LPS干预组)、C组(LPS+10-7 mol/L坎地沙坦)、D组(LPS+10-6 mol/L坎地沙坦)和E组(LPS+10-5 mol/L坎地沙坦)。实时定量PCR和Western blot测定各组细胞TLR4、髓样分化因子88(Myd88)mRNA和蛋白的表达、NF-κB(p65)的核转位水平;ELISA测定各组细胞上清液白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平;DCFH-DA氧化法测定细胞内活性氧(iROS)含量。使用TLR4阻滞剂TLR4抗体、NADPH氧化酶阻滞剂二联苯基碘(DPI)、NF-κB阻滞剂PDTC或坎地沙坦与阻滞剂联用预处理细胞,ELISA法测定IL-1β和TNF-α分泌水平。结果坎地沙坦在10-810-3 mol/L浓度范围内对VSMCs活性没有显著影响。同对照组相比,坎地沙坦可以有效抑制LPS诱导VSMCs IL-1β和TNF-α的释放,减少TLR4、Myd88mRNA和蛋白的表达以及iROS的生成,抑制NF-κB(p65)的核转位,并具有剂量依赖性。TLR4抗体、DPI、PDTC均能有效地抑制LPS诱导的炎症因子释放,坎地沙坦与阻滞剂联用显示出更强的抗炎作用。结论坎地沙坦能够减少LPS诱导的VSMCs炎症因子IL-1β和TNF-α的分泌,这一作用可能是通过抑制TLR4/Myd88-iROS-NF-κB信号通路而实现的。

• 单位
  郑州大学第一附属医院; 苏州大学