pSiRNA-Notch1逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞的作用

作者：尹昌林; 吕胜青; 黄轶; 李光辉; 唐莉; 杨辉

来源：第三军医大学学报, 2007, (12): 1211-1214.

• pSiRNA-Notch1逆转录病毒载体
• 恶性脑胶质瘤
• 基因治疗 pSiRNA-Notch1 retroviral vector
• malignant glioma
• gene therapy

目的建立逆转录病毒介导的人Notch1基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer5.1-H1Retro中,构建成携带人Notch1基因RNAi逆转录病毒载体pSiRNA-Notch1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞,用WST-8、RT-PCR和Western blot分别检测对转染细胞活性、人Notch1 mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA-Notch1质粒经测序鉴定正确。重组逆转录病毒滴度可达224×104cfu/ml,感染U...

• 单位
  重庆医科大学; 中国人民解放军陆军军医大学; 新桥医院