猪圆环病毒2型亲和肽双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证

作者：郝俊芳; 黄凯; 崔艳艳; 王冠; 马冰冰; 王方雨^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(11): 1371-1376.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0197

• 猪圆环病毒2型
• 亲和肽
• 双抗体夹心ELISA

为了研究猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白亲和肽的病毒亲和性，建立双抗体夹心ELISA检测方法，并进行验证。利用本实验室制备的PCV2 6A5单抗作为捕获抗体，以期固定PCV2，采用方阵滴定法确定双抗体夹心ELISA法中各组分的最佳工作浓度和条件，并对方法进行最低检测限、灵敏度、特异性和重复性验证。结果显示，捕获抗体最佳工作浓度为25μg/mL,PCV2病毒液按1∶80稀释，亲和肽最低检测限为0.5μg/mL；特异性试验结果显示，与猪瘟病毒E2蛋白的5条亲和肽无交叉反应；重复性试验结果显示，批内重复性为3.73%～8.51%，批间重复性为3.93%～7.88%。上述结果表明，建立的猪圆环病毒2型亲和肽双抗体夹心ELISA检测方法特异性、灵敏度、重复性良好，可为PCV2亲和肽的筛选鉴定提供技术支撑。

• 单位
  河南省农业科学院; 商丘师范学院