呕吐毒素时间分辨荧光免疫层析法的建立与评价

作者：张东升; 严艺琳; 熊晓辉; 董曼佳; 游京晶; 张一平

来源：食品工业科技, 2018, 39(20): 233-239.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2018.20.039

• 呕吐毒素
• 时间分辨荧光微球
• 免疫层析法
• 评价
• 检测

构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu3+螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲体系;研究了方法的灵敏度、精密度及准确度。结果表明,每100μL荧光微球结合纯单抗50μg,最佳划膜浓度为1.0 mg/m L,最佳测定条件为室温(25±2)℃,10 min,加样体积100μL,PBS (0.01 mol/L,pH7.2)的缓冲体系,方法的灵敏度为0.25 ng/m L,线性范围为0.525.0 ng/m L,玉米、小麦阴性样本(加标浓度200、500、1000、2000μg/kg)平均加标回收率为91.4%109.3%,6种典型样本经TRFIA与免疫亲和净化-高效液相色谱法(IAC-HPLC)同时测定DON含量,相关系数r达0.9754。TRFIA具有灵敏度高、速度快、定量准等技术特点,适用于谷物及制品中DON的快速定量。

• 单位
  江苏省苏微微生物研究有限公司; 南京工业大学