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摘要
目的 探讨PI3K/AKT通路在巨噬细胞糖酵解中的作用，拟从代谢重编程的角度阐明巨噬细胞M1极化的机制。方法 以脂多糖(LPS)处理RAW264.7细胞建立巨噬细胞M1极化模型；使用2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)抑制糖酵解过程；使用LY294002抑制PI3K/AKT活性；Seahorse XF糖酵解速率试剂盒检测巨噬细胞糖酵解水平；q-PCR方法检测巨噬细胞M1型标记(诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素1β),葡萄糖酵解相关基因(Glut1、HK2、Idha和Aldoa);Western blot方法检测p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-p65、p65、IκB、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和GAPDH水平。结果 在LPS诱导的RAW264.7细胞M1极化模型中，p-mTOR和p-AKT水平升高，HIF-1α表达水平升高，糖酵解相关基因水平升高，细胞外酸化率升高，表明LPS诱导细胞糖酵解水平升高；2-DG抑制糖酵解，降低M1极化相关因子的mRNA水平；LY294002抑制PI3K/AKT活性，降低p-mTOR水平和HIF-1 α的蛋白水平，降低糖酵解相关基因水平，进而抑制RAW264.7糖酵解水平和M1极化过程。结论 在RAW264.7细胞中PI3K/AKT信号通路通过激活mTOR信号通路，激活糖酵解，从而激活巨噬细胞M1极化过程。
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