A型塞内卡病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用

作者:柴茂; 马震原; 王淑娟; 赵雪丽; 刘影; 王东方; 杨海波; 谢彩华; 王翠; 王华俊; 闫若潜*
来源:中国动物传染病学报, 2023, 31(02): 133-139.
DOI:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20211209.001

摘要

为建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A(SVA)抗体血清学方法。本研究扩增SVA VP2基因和VP3基因(VP23基因),基因全长1569 bp,并与原核表达载体pGEX-6p-1构建重组载体,IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白,经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23蛋白,分子量约为58 kDa。通过矩阵优化、确定临界值、敏感性分析、特异性鉴定,建立了SVA抗体间接ELISA方法。该方法的S/P临界值标准为0.35,批内批间变异系数均小于7%,与中和试验结果符合率为95.49%。上述结果表明,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查。

  • 单位
    河南省动物疫病预防控制中心