人源神经降压素受体-1稳转细胞系的建立及其应用

作者：张果; 孙涛; 刘慧娟; 牛国君; 徐峰

来源：药学学报, 2014, 49(09): 1273-1278.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2014.09.014

• CHO/NTR1
• 钙离子浓度检测
• 神经降压素受体

神经降压素受体-1(neurotensin receptor-1,NTR1)是G蛋白偶联受体家族的成员,调节细胞内钙离子的水平。NTR1与多种疾病的发生发展密切相关。为寻找与NTR1相关的拮抗剂,建立了稳定表达人源NTR1蛋白的中国仓鼠卵巢细胞系CHO/NTR1。将重组质粒利用脂质体转染的方法转入CHO细胞,加入G418抗生素进行筛选,采用Western blotting和钙离子浓度检测来评判CHO/NTR1细胞系是否构建成功。通过钙离子浓度检测,可以得到NTR1的天然配体神经降压素(neurotensin,NT)的EC50值和NTR1的已知拮抗剂SR48692的IC50值。结果提示,人源CHO/NTR1稳转细胞系可以用来研究NTR1的生物学特征和进一步筛选NTR1的拮抗剂与激动剂。

• 单位
  药物化学生物学国家重点实验室; 南开大学; 天津国际生物医药联合研究院