龙头鱼ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者：褚梦洁; 王铮; 林彦均; 朱兰倩; 胡静雯

来源：科技风, 2020, (32): 145-147.

DOI：10.19392/j.cnki.1671-7341.202032068

• 龙头鱼
• ISSR-PCR
• 反应条件优化

以Tris平衡酚-氯仿法提取的龙头鱼基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板,采用单因素试验法,对影响PCR扩增体系的d NTPs、模板DNA、引物浓度和Taq DNA聚合酶4种试剂的用量作为独立因素进行优化,创建了最适合龙头鱼的ISSRPCR反应体系。结果表明:20μL的PCR反应液的组分和用量为含Mg2+的10×PCR Buffer 2.0μL,d NTPs2.5μL,Taq DNA聚合酶0.2μL,引物1.0μL,DNA模板1.4μL,双蒸水12.9μL时扩增条带最清晰。这一实验结果为龙头鱼后续开展ISSR遗传多样性分析奠定了基础。

• 单位
  浙江海洋大学