PGC-1α调控非酒精性脂肪肝病线粒体功能的作用研究

作者：王雪梅; 王怡婷; 车悦; 汪洁英; 门可^*

来源：医学研究杂志, 2023, 52(09): 79-91.

• 非酒精性脂肪肝
• 脂质蓄积
• 线粒体功能
• 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α

目的 探究过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferators-activated receptors gamma co-activator 1α,PGC-1α)介导线粒体功能对游离脂肪酸(free fatty acids, FFA)诱导的HepG2非酒精性脂肪肝病模型的作用机制。方法 HepG2细胞分为4组，即对照组、FFA模型组(1.5mmol/L FFA孵育24h)、LV-PGC-1α干预组(PPARGC1A慢病毒转染后，1.5mmol/L FFA孵育24h)和LV-control干预组(阴性对照慢病毒转染后，1.5mmol/L FFA孵育24h)。磷酸甘油氧化酶法检测细胞内甘油三酯(triglyceride, TG),胆固醇氧化酶法检测总胆固醇(total cholesterol, TC)含量；油红O染色观察脂滴聚集；比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX)的活性，丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量；微板法检测细胞上清液天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)变化；ATP试剂盒检测细胞ATP含量，PCR检测mtDNA复制倍数；Western blot法检测脂质分解和线粒体生物合成相关蛋白的表达情况。结果 与对照组比较，FFA模型组细胞内脂质蓄积显著增加，肝细胞损伤加重，氧化应激水平升高，细胞ATP含量下降，mtDNA复制倍数减少，脂质分解蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activatedreceptors alpha, PPARα)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1A(carnitine palmitoyltransferase-1A,CPT-1A)表达降低，线粒体生物合成相关蛋白PGC-1α、核呼吸因子1(nuclear respiratory factor-1,NRF-1)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,mtTFA)表达降低。与LV-control干预组比较，LV-PGC-1α干预组细胞内TG和TC含量显著降低，脂滴蓄积减少，肝细胞损伤降低，细胞氧化应激损伤减轻，细胞ATP含量增加，mtDNA复制倍数增加，脂质分解和线粒体生物合成相关蛋白的表达增加。结论 PGC-1α过表达增强线粒体生物合成、ATP生成、减轻氧化应激，加强脂肪酸氧化分解，降低HepG2细胞脂质蓄积。

• 单位
  公共卫生学院; 西安医学院