ROS/JNK/FoxO3a信号通路在钩吻素子抑制结肠癌细胞增殖和诱导凋亡中的作用

作者：赵斌; 吴紫陆; 席作武^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(24): 100-108.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20212422

• 钩吻素子
• 细胞凋亡
• 活性氧
• 氨基末端激酶
• 叉头蛋白O3a

目的:以人结肠癌细胞HCT-116细胞为研究对象,通过在培养液中加入不同浓度的钩吻素子(Kou,0,100,200,400μmol·L-1),进一步探讨Kou对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子作用机制。方法:Kou体外干预HCT-116细胞24 h后,用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测其对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡及活性氧(ROS)的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测叉头蛋白O3a(FoxO3a)mRNA表达情况,采用小干扰核糖核酸(siRNA)进行细胞转染,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测FoxO3a靶基因蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,Kou处理明显降低了HCT-116细胞的增殖率(P<0.05,P<0.01),呈剂量依赖性。与空白组比较,Kou处理引起细胞周期阻滞于G0/G1期并诱导HCT-116细胞的凋亡(P<0.05,P<0.01),其作用与Kou的浓度呈正相关;FoxO3a siRNA干扰显著降低了FoxO3a及其下游相关细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21),细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B(p27)和细胞死亡调解子(Bim)蛋白的表达(P<0.01)。与空白组比较,Kou处理诱导了HCT116细胞中氨基末端激酶(JNK)的活化(P<0.01),JNK特异性抑制剂(SP600125)处理抑制了Kou诱导的FoxO3a活化及其下游相关蛋白的表达(P<0.01);乙酰半胱氨酸(NAC)处理显著降低了Kou诱导的ROS水平和JNK信号的活化(P<0.01)。结论:Kou能有效抑制结肠癌细胞HCT-116的增殖,促进HCT-116细胞的凋亡,其机制可能与其作用于ROS/JNK/FoxO3a途径有关。

• 单位
  第二临床医学院; 河南中医药大学; 河南省中医院