人参皂苷Rg1改善皮质酮致星形胶质细胞缝隙连接损伤的机制研究

作者：夏聪媛; 王真真; 陈乃宏^*

来源：神经药理学报, 2019, 9(04): 62-63.

• 抑郁症
• 星形胶质细胞
• 缝隙连接
• 人参皂苷Rg1
• Cx43

目的:人参皂苷Rg1是传统补益中药人参(Panax Ginseng C. A. Mey)的主要成分之一,对多种抑郁动物模型具有抗抑郁作用,但其分子机制仍未完全阐明。最新报道,抑郁模型动物出现星形胶质细胞缝隙连接损伤现象,但机制尚未阐明。本文旨在建立皮质酮损伤星形胶质细胞缝隙连接功能损伤模型,阐明皮质酮损伤星形胶质细胞缝隙连接的作用机制,并评价Rg1是否通过星形胶质细胞缝隙连接发挥抗抑郁作用。方法:首先分离培养新生大鼠前额皮层和海马组织中的原代星形胶质细胞,利用皮质酮(50μmol·L-1,24 h)模拟应激条件。通过划痕标记免疫示踪实验检测缝隙连接功能,蛋白免疫印迹实验检测Cx43蛋白及磷酸化水平,免疫荧光实验检测Cx43蛋白胞浆胞膜分布,免疫共沉淀实验检测Cx43与膜蛋白间相互作用,PCR实验检测Cx43生成阶段的变化。结果:皮质酮显著减少原代星形胶质细胞中Cx43的全蛋白含量,减少Cx43在细胞膜上的分布,上调Cx43 Serine368位点磷酸化水平。皮质酮显著降低Cx43的mRNA水平,并且促进Cx43的降解。前额皮质脑区星形胶质细胞:皮质酮促进Cx43与ZO-1/Drebrin的相互作用,增加N-cadherin的含量;海马脑区星形胶质细胞:皮质酮促进Cx43与ZO-1/Drebrin的相互作用,降低N-cadherin的表达。皮质酮刺激前,Rg1(0.1,1,10μmol·L-1)预孵育1小时。1μmol·L-1 Rg1和10μmol·L-1 Rg1显著增加星形胶质细胞间荧光黄染料的扩散面积,显著增加Cx43全蛋白含量,并下调Cx43 Serine368位点磷酸化水平。结论:本实验首次利用皮质酮建立缝隙连接功能损伤模型,提供了抑郁症相关的体外模型。皮质酮应激条件下,星形胶质细胞缝隙连接功能被损伤,该过程与Cx43生命周期紊乱有关。Rg1改善皮质酮介导的星形胶质细胞缝隙连接功能损伤,为进一步阐明了Rg1的抗抑郁作用机制提供了基础。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院; 药物研究所