光化激活9-羟基脱镁叶绿酸-α诱导人喉鳞状细胞癌HN-3细胞凋亡与迁徙抑制

作者：何培杰; 毛雯静; 张焕康; 周梁

来源：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2015, 29(15): 1367-1371.

DOI：10.13201/j.issn.1001-1781.2015.15.012

• 喉肿瘤
• 鳞状细胞癌
• 光动力疗法
• 凋亡
• 迁徙运动

目的:探讨新型光敏剂9-羟基脱镁叶绿酸-α(9-HPbD)介导的光动力疗法(PDT)对HN-3人喉鳞状细胞癌细胞的凋亡诱导、迁徙抑制作用及其机制。方法:以不同浓度的9-HPbD(0.29μg/ml,0.59μg/ml)孵育贴壁的HN-3细胞6h,664nm二极管激光(能量密度为2.0J/cm2)照射光敏化的HN-3细胞15min。光照后立即行细胞划痕,并于光照后0、12、24、36h分别在相同划痕位置进行拍照,计算细胞迁徙距离;光照后1h行H2DCFDA染色并分别以荧光法及流式细胞术测定活性氧生成(ROS);光照24h后行MTT实验、Hoechst33342/PI双重染色、蛋白印迹法(Western blotting)评价细胞增殖活力、细胞核形态及eNOS、p-c-Jun、EGFR表达。结果:19-HPbD-PDT显著抑制HN-3细胞增殖,9-HPbD单独孵育(未进行激光照射)与单纯激光照射均未显示对HN-3细胞的生长抑制。2PDT后HN-3细胞活性氧产生明显增加,细胞核浓缩、碎裂,eNOS、p-c-Jun表达上调。39-HPbD-PDT显著抑制HN-3细胞迁徙能力,呈光敏剂剂量相关性。PDT后HN-3细胞EGFR表达下调。4以活性氧阻滞剂谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸预孵育HN-3细胞,光动力触发的凋亡诱导、迁徙抑制等被部分阻滞。结论:19-HPbD-PDT对HN-3细胞具有光化学毒性,p-c-Jun通路激活及eNOS表达上调、EGFR表达下调可能参与了细胞凋亡与迁徙抑制的诱导。2活性氧生成在9-HPbD-PDT诱导HN-3细胞凋亡与迁徙抑制中发挥重要作用。

• 单位
  复旦大学附属眼耳鼻喉科医院