人血管内皮细胞生长因子165重组腺病毒的构建及其在真核细胞中的表达

作者：杨健; 程鑫华; 黄振华; 余永桂

来源：武汉大学学报(医学版), 2010, (04): 430-434.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2010.04.002

• hVEGF165
• 基因转染
• 重组腺病毒 hVEGF165
• Gene Transfection
• Recombinant Adenovirut

目的:体外构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的腺病毒表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法:从重组质粒pcDNA3/hVEGF165中获得hVEGF165,经酶切及测序鉴定,将hVEGF165基因亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,重组穿梭质粒经酶切线性化后,与pAEdasyl质粒在大肠杆菌BSJ183中进行同源重组,线性化后转染HEK293细胞进行包装扩增获取重组病毒上清,同时应用RT-PCR及ELISA法检测hVEGF165的表达。结果:目的基因的测序结果与人VEGF165序列(Genbank)相符。转染后经RT-PCR和ELISA检测证实转染重组质粒组hV...

• 单位
  湖北医药学院; 武汉大学