副猪嗜血杆菌RfaF基因的原核表达及抗原性分析

作者：冯晓辉; 余远迪; 任玉鹏; 岳华; 张斌

来源：动物医学进展, 2013, (04): 39-42.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2013.04.003

• 副猪嗜血杆菌
• RfaF基因
• 原核表达
• 抗原性 Haemophilus parasuis
• RfaF gene
• prokaryotic expression
• antigenicity

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)RfaF基因编码脂多糖庚糖基转移酶Ⅱ,参与了细菌的黏附入侵和抗血清中补体杀菌作用。为了进一步研究庚糖基转移酶Ⅱ的功能,用原核表达系统表达H.parasuis RfaF基因。用特异性引物扩增H.parasuis SC096株血清4型RfaF基因,得到一条1 053bp的片段,将其连接到pET-32a(+)载体上,构建重组表达质粒,并将其转化至DH5α感受态细胞中,经酶切、PCR和测序进行鉴定。测序正确后,提取重组质粒,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用IPTG进行诱导。将诱导产物进行SDS-PAGE和Western b...

• 单位
  西南民族大学