ART-PCR方法的建立及扩增低拷贝RNA的初步研究

作者：李铁军; 周宋峰; 陆毅祥; 朱远源

来源：药物生物技术, 2013, (06): 475-479.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2013.06.002

• 依赖反义RNA的核糖核酸酶T1 PCR
• 低拷贝
• 高拷贝
• 基因
• RNase T1
• dsRNA
• ssRNA
• 病毒 Antisense-based RNase T1 PCR
• Low copy
• High copy
• Gene
• RNase T1
• dsRNA
• ssRNA
• Virus

建立依赖反义RNA和核糖核酸酶T1(RNase T1)的PCR方法,称为ART-PCR,用于扩增高拷贝RNA和复杂RNA样本中的低拷贝RNA。首先,设计待检低拷贝RNA的反义RNA分子,在高拷贝和复杂RNA样本中与待检低拷贝RNA退火后用RNase T1消化,反转录后用PCR扩增。进一步,用ARPE-19细胞中低表达基因干扰素γ(IFNG)作为实例,用ART-PCR和常规实时定量PCR(RT-qPCR)检测。结果显示,用ART-PCR可以很好地消除常规RT-qPCR中低拷贝RNA的PCR抑制效应。研究结果初步表明ART-PCR可以作为检测低拷贝RNA的理想工具,这对于RNA功能的基础研究以及基...

• 单位
  中国药科大学; 百奥迈科生物技术有限公司; 南通大学