摘要
目的初步探讨甘草次酸对银屑病患者角质形成细胞增殖、凋亡的影响以及可能的作用机制。方法体外原代培养银屑病患者角质形成细胞, 将传代2~ 3次后的角质形成细胞分为对照组和药物处理组, 药物处理组加入甘草次酸, 使其终浓度分别为1、2、4、8和10 mg/L, 对照组不加甘草次酸。作用24~ 72 h后, MTS法检测甘草次酸对角质形成细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度甘草次酸处理24 h后, 角质形成细胞凋亡的变化;实时荧光定量PCR检测甘草次酸对银屑病患者角质形成细胞miR-21表达的影响。结果 1~ 10 mg/L甘草次酸作用角质形成细胞24~ 72 h后, 随着甘草次酸作用时间延长和浓度增加, 细胞增殖率逐渐下降。1、2、4、8和10 mg/L甘草次酸作用24 h后, 角质形成细胞凋亡率分别上升至(9.64 ± 0.86)%、(25.24 ± 2.93)%、(27.68 ± 3.70)%、(35.55 ± 4.23)%、(38.89 ± 2.31)%;两两比较显示, 除1 mg/L甘草次酸组外, 其他各组与对照组(10.09 ± 0.69)%相比, 差异均有统计学意义(均P < 0.01)。1、2、4 mg/L甘草次酸处理角质形成细胞24 h后, miR-21表达水平(2-ΔΔCt)分别为0.24 ± 0.04、0.22 ± 0.07、0.17 ± 0.05, 与对照组0.92 ± 0.12相比, 差异有统计学意义(F= 213.10, P < 0.05)。2 mg/L甘草次酸作用18、24、48 h后, miR-21基因表达水平分别为0.55 ± 0.02、0.22 ± 0.06、0.15 ± 0.06, 总体呈下降趋势, 与对照组(0.98 ± 0.02)相比, 差异有统计学意义(F= 238.10, P < 0.05)。结论甘草次酸可抑制银屑病患者角质形成细胞的增殖, 促进其凋亡, 其机制可能与下调miR-21表达有关。
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单位浙江大学医学院附属第二医院; 浙江中医药大学; 江苏省常州市第一人民医院