miRNA-1对胃癌细胞体外EGFR-TKI敏感性影响的实验研究

作者：娄智; 吉亚君^*; 王鑫; 胡晨曦; 刘玮萱

来源：临床肿瘤学杂志, 2022, 27(02): 103-108.

• 胃癌
• EGFR-TKI
• miR-1
• AZD9291(奥西替尼)
• IGF-1R/PI3K/AKT信号通路

目的 探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）敏感性影响的研究。方法 选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象，慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA，分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组，并采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测GES-1和MKN-45细胞中miR-1表达。另外设置空白对照组和阴性对照组。采用MTT法检测MKN-45细胞对不同浓度AZD9291（奥西替尼）的敏感性；流式细胞术检测1μmol/L AZD9291作用48 h后MKN-45细胞凋亡活力和细胞周期。采用Western blotting法检测各组细胞中PI3K/AKT通路相关蛋白的表达。结果 qPCR证实miR-1在MKN-45细胞系中低表达。MTT法检测结果显示，与空白对照组比较，miR-1组细胞对AZD9291敏感性明显增加，而miR-1 shRNA组细胞对AZD9291敏感性明显降低。Annexin V/PI双染法和BrdU法检测，miR-1组细胞凋亡率为（44.65±5.18）%，高于空白对照组的（15.40±2.13）%和阴性对照组的（17.92±3.14）%，差异有统计学意义（P<0.05）。miR-1 shRNA组细胞凋亡率为（11.20±2.48）%，低于空白对照组和阴性对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。与空白对照组和阴性对照组比较，miR-1组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显降低，miR-1shRNA组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 上调miR-1表达可增加MKN-45胃癌细胞系对AZD9291的敏感性，其作用机制可能与抑制IGF-1R/PI3K/AKT信号通路的激活有关。

• 单位
  连云港市第一人民医院