沉默结缔组织生长因子基因重组腺病毒的构建及功能验证

作者：梁睿; 康权; 谭俊杰; 赵利华; 索涛莉; 孙艳辉; 金先庆; 罗庆

来源：肿瘤, 2010, (03): 194-198.

• 腺病毒科感染
• DNA
• 重组
• RNA干扰
• 基因
• CTGF
• 细胞
• 4T1 Adenoviridae infections
• DNA
• recombinant
• RNA interference
• Gene
• CTGF
• Cell
• 4T1

目的:构建沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad-siCTGF,并进行功能验证。方法:选取已验证的能高效沉默CTGF基因的靶序列,克隆入载体pSES-HUS中;将质粒线性化处理后与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转染大肠埃希菌BJ5183,构建重组腺病毒载体Ad-siCTGF;腺病毒载体用PacI酶切线性化处理后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒;采用"乒乓交互感染法"提高病毒滴度。用此病毒感染4T1细胞,行实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR...

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院