乙型脑炎病毒疫苗株包膜蛋白K138E回复突变对其神经毒力的影响

作者：袁磊; 唐丽萍; 黄荣; 冯亚岚; 杨会强; 杨健^*; 李玉华^*

来源：中国病原生物学杂志, 2019, 14(07): 790-795.

DOI：10.13350/j.cjpb.190710

• 乙型脑炎
• 回复突变
• 神经毒力
• 感染性克隆

目的探索乙型脑炎疫苗株包膜蛋白(E蛋白)138位氨基酸向野毒株回复突变对其神经毒力与神经侵袭力的影响。方法采用重叠延伸PCR技术扩增含有K138E突变位点的DNA片段,构建乙脑疫苗株E蛋白K138E位氨基酸突变的病毒感染性克隆,体外转录病毒RNA,电转染BHK21细胞拯救病毒,绘制病毒生长曲线,采用蚀斑试验与测序鉴定突变病毒,通过动物试验评价突变病毒与疫苗株对昆明小鼠的神经毒力和神经侵袭力。结果酶切和测序表明K138E突变病毒感染性克隆构建成功,并通过电转染BHK21细胞包装得到K138E突变病毒。蚀斑试验显示突变病毒的蚀斑稍大于疫苗株,两株病毒的生长曲线与神经侵袭力无明显不同,但突变病毒神经毒力显著升高。结论乙脑疫苗株E138位氨基酸回复突变后神经毒力增强,E138位氨基酸是调控疫苗株神经毒力的重要位点。

• 单位
  川北医学院; 中国食品药品检定研究院; 基础医学院