摘要
目的 Elabela活性片段ELA32在对比剂肾病中可减轻肾损伤,但ELA14在对比剂肾病中作用仍不明确。文章探究Elabela活性片段ELA14在对比剂致大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)凋亡中作用及机制。方法 实验分组:对照组、碘普罗胺(IOP)组(加入21 mgI/mL IOP)、IOP+高、低剂量ELA32组(21 mgI/mL IOP与30 nmol/L、3μmol/L ELA32共同孵育)、IOP+高、低剂量ELA14组(21 mgI/mL IOP与30 nmol/L、3μmol/L ELA14共同孵育)。用流式细胞仪检测细胞凋亡率、CCK-8评估细胞活力,酶联免疫法测定炎症因子,线粒体活性氧法测定ROS强度,Western blot、qRT-PCR检测细胞mRNA和蛋白表达量。结果 IOP组细胞凋亡率[(17.306±0.848)%]较对照组[(4.860±0.182)%]明显升高(P<0.05),且ROS强度、炎性因子水平(IL-6、TNF-α、NRF2 mRNA及ICAM-1mRNA)及DNA损伤相关蛋白(caspase、CHK1、ATR)的表达均较对照组明显升高(P<0.05)。高、低剂量的ELA14[(8.813±0.397)%、(11.800±0.756)%]可明显改善IOP[(17.306±0.848)%]诱导的细胞凋亡率(P<0.05),但与同等剂量的ELA32效果差异无统计学意义(P>0.05),另外ELA32和ELA14均可改善ROS水平、炎症因子水平及DNA损伤相关蛋白的表达。IOP组细胞荧光强度(3 842.780±444.146)较对照组(240.18±80.941)明显升高,而IOP+高、低剂量ELA32组和IOP+高、低剂量ELA14组细胞荧光强度(807.810±98.798、2 008.460±332.571、1 362.716±415.551、2 325.856±455.404)较IOP组明显减弱(P<0.05)。结论 与ELA32相似,ELA14也可抑制IOP诱导的NRK-52E细胞氧化应激、炎症反应及细胞凋亡,并呈剂量依赖性,该作用可能通过抑制氧化炎症反应实现。
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