摘要
目的研究糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸(3-BrPA)对单向混合培养的异基因小鼠脾细胞增殖的影响及其机制。方法以BALB/c(H-2d)小鼠脾细胞为刺激细胞,以C57BL/6(H-2b)小鼠脾细胞为反应细胞,建立单向混合淋巴细胞培养(MLC)体系,给予不同浓度3-BrPA(0200μmol/L)处理后,采用CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性,流式细胞术检测MLC体系中反应细胞CD3、CD4、CD8等表面标志表达,ELISA法检测MLC体系上清中IL-4、IFN-γ等细胞因子水平。结果CCK-8检测结果显示,高浓度(20μmol/L以上)3-BrPA可抑制MLC体系中的T细胞增殖,并呈剂量依赖性,培养24、36、48 h的半数抑制浓度(IC50值)分别为48.6、41.2和41.9μmol/L。50μmol/L3-BrPA处理24 h后MLC体系上清中IFN-γ的浓度为(164.25±20.14)ng/L,明显低于对照组[(277.61±18.46)ng/L](P<0.05);IL-4的浓度为(31.06±6.06)ng/L,高于对照组[(28.64±3.97)ng/L],IFN-γ/IL-4比值明显降低。结论浓度为20和50μmol/L的3-BrPA对体外异基因MLC体系小鼠T细胞增殖有抑制作用,使Th1/Th2细胞平衡向Th2细胞偏移。
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