摘要
目的建立诃子水提物中诃子酸、没食子酸含量测定方法;研究诃子水提物对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠肠道免疫调节的影响,发现药物作用的新靶点。方法 HPLC法检测诃子酸、没食子酸含量;采用牛II型胶原与不完全弗氏佐剂诱导建立CIA大鼠模型,并设正常对照组,模型组,雷公藤组(9.45 mg·kg-1),诃子高、中、低剂量组(4、2、1 mg·kg-1),连续给药4周。HE观察肠道的组织病理学形态;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清CD4与CD25的含量;PCR法扩增细菌V3-V4区16SrDNA,分析肠道细菌丰富度、Shannon、Chao指数及主要菌群分布。结果诃子水提物中诃子酸、没食子酸各占3.07%,2.30%,模型对照组血清CD4及CD25的含量显著高于正常组(P<0.05);各用药组阳性表达较模型对照组均有不同程度的降低(P<0.05),诃子提取物高剂量组与雷公藤组相比差异无统计学意义(P>0.05)。肠道菌群分析结果:各组大鼠其肠道菌群物种丰富度和多样性均较正常组下降。诃子高组、雷公藤组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论诃子水提物能明显缓解CIA模型大鼠关节炎表现,有效降低CIA大鼠血清CD4、CD25的表达,调节肠道菌群失衡,可能是诃子在临床上能够有效治疗类风湿关节炎的有效机制之一,诃子质量标准研究为该药合理开发利用奠定了基础。
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