miR-122过表达转基因小鼠质粒构建及其功能验证

作者：马纪; 孙奋勇; 张越; 洪岸

来源：中国生物工程杂志, 2011, (09): 28-34.

DOI：10.13523/j.cb.20110905

• miR-122
• 过表达
• Sensor reporter
• 转基因小鼠 miR-122 Overexpression Sensor reporter Tansgenic mouse

目的:比较两种miR-122转基因小鼠过表达载体构建方法,为建立miR-122过表达转基因小鼠奠定基础。方法:PCR扩增长约291bp的pre-miR-122的序列,分别定向克隆到pBROAD3-GFP载体GFP基因上游内含子或下游3′UTR区域,两种质粒分别转染293T细胞,Q-PCR检测miR-122和GFP的表达水平,并观察GFP绿色荧光。miR-122 sensor reporter是将3个miR-122成熟序列的反义序列串联克隆至psiCHECK2载体luciferase 3′UTR中,然后分别与2种miR-122过表达质粒载体共转染293T细胞,最后检测荧光素酶活性来鉴定miR-1...

• 单位
  上海市第十人民医院; 暨南大学