醛脱氢酶8A1融合蛋白的表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

作者:刘佳莹; 李淑珍; 李晓玲; 刘莹; 柳晓兰; 高建恩; 仲飞; 孙启鸿
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2008, (12): 1197-1198+1201.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.004568

摘要

目的:重组表达醛脱氢酶8A1(aldehyde dehydrogenase 8 family member A1,ALDH8A1)蛋白,制备其多克隆抗体,并进行抗体的特异性鉴定,以及蛋白在组织和细胞内的定位。方法:以成人肝cDNA文库为模板,PCR扩增ALDH8A1目的片段,并构建重组表达载体pGEX-4T-1-ALDH8A1和pET-32a-ALDH8A1,经测序鉴定插入载体的DNA片段序列正确后,转化大肠杆菌BL21,诱导表达GST-ALDH8A1和His-AL-DH8A1融合蛋白。经Western blot确定其为目的蛋白后,纯化重组融合蛋白,并以GST-ALDH8A1免疫家兔制备抗人A...

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