RNA干扰下调叉头转录因子M1基因对人肿瘤细胞生长、克隆和侵袭的影响

作者：范钰; 徐娟; 周永静; 陈琳; 赵松兰

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(07): 1543-1546.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2014.07.052

• 卵巢肿瘤
• 叉头转录因子M1
• 增殖
• 侵袭
• RNA干扰

目的观察RNA干扰下调叉头转录因子M1(FoxM1)基因对肿瘤细胞生长、克隆形成和侵袭的影响。方法培养8株人卵巢癌细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检查FoxM1基因mRNA水平。设计并用化学方法合成FoxM1基因小干扰RNA(siRNA),转染处理SKOV-3细胞,选择下调效果最好的siRNA。SKOV-3和HO-8910PM细胞均分为3组:空白对照组(Con-A)、空载质粒对照组(Con-B)和siRNA组(siRNA),其中,siRNA组以FoxM1 siRNA转染处理。分别应用FQ-PCR和Western blot方法检测各组癌细胞FoxM1基因mRNA和蛋白水平。以细胞计数试剂盒(CCK-8)方法检测生长,以平板克隆方法检测癌细胞克隆形成能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果 8株卵巢癌细胞株中,SKOV-3和HO-8910PM细胞FoxM1基因mRNA表达水平最高。FoxM1基因siRNA转染SKOV-3细胞后,72 h Con-A、Con-B和siRNA组吸光度(A)值分别为2.455±0.033、2.442±0.025和1.312±0.028(P<0.05);平板克隆结果显示,Con-A、Con-B和siRNA克隆形成数分别为(100±5)、(93±8)和(51±3)个(P<0.05);Transwell结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组穿膜细胞数分别为(93±4)、(86±3)和(36±1)个(P<0.05)。FoxM1基因siRNA转染HO-8910PM细胞后,72 h,Con-A、Con-B和siRNA组A值分别为2.691±0.039、2.560±0.033和1.455±0.027(P<0.05);平板克隆结果显示,Con-A、Con-B和siRNA克隆形成数分别为(146±7)、(145±8)和(85±2)个(P<0.05);Transwell结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组穿膜细胞数分别为(449±15)、(445±11)和(151±9)个(P<0.05)。结论 FoxM1基因在人卵巢癌细胞生长、增殖和侵袭起重要作用。

• 单位
  江苏大学附属人民医院