α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂对缺氧复氧大鼠心肌细胞糖原合成酶激酶3β活性的影响

作者：崔昕龙; 程怡; 薛富善; 王世玉; 李瑞萍; 刘高谱; 杨桂珍; 廖旭; 刘建华

来源：中华麻醉学杂志, 2014, 34(11): 1375-1378.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1416.2014.11.025

• 胆碱能激动剂
• 缺氧
• 氧
• 肌细胞,心脏
• 糖原合成酶激酶
• 炎症

目的评价α7烟碱型乙酰胆碱(α7nACh)受体激动剂对缺氧复氧大鼠心肌细胞糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)活性的影响。方法大鼠心肌细胞培养72 h后,按照随机数字表法分为3组(n=18):对照组(C组)、缺氧复氧组(AR组)和α7nACh受体激动剂组(PNU282987组)。C组心肌细胞正常培养;AR组心肌细胞缺氧6 h后复氧;PNU282987组心肌细胞缺氧6 h后复氧,在复氧培养基中加入用DMSO溶解的PNU282987,终浓度30μmol/L,C组和AR组加入等浓度DMSO。于复氧6 h时采用比色法检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测凋亡情况,Western blot法检测GSK-3β与磷酸化GSK-3β(p-GSK-3βSer9)、NF-κB p65与磷酸化NF-κBp65(p-NF-κB p65Ser536)蛋白的表达,ELISA法检测心肌细胞培养上清液IL-6与TNF-α的浓度。结果与C组比较,AR组和PNU282987组心肌细胞LDH漏出率升高,正常细胞百分比降低,早期凋亡细胞百分比和晚期凋亡细胞百分比均升高,心肌细胞p-GSK-3βSer9、NF-κBp65和p-NF-κB p65 Ser536蛋白表达上调,心肌细胞培养上清液IL-6和TNF-α浓度升高(P<0.01),心肌细胞GSK-3β蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与AR组比较,PNU282987组LDH漏出率降低,正常细胞百分比升高,早期凋亡细胞百分比降低(P<0.01),晚期凋亡细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05),心肌细胞p-GSK-3βSer9蛋白表达上调,心肌细胞p-NF-κB p65 Ser536蛋白表达下调,心肌细胞培养上清液IL-6和TNF-α浓度均降低(P<0.01),NF-κB p65蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论α7nACh受体激动剂可通过降低GSK-3β活性抑制炎性反应,从而减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院