一种区分田鼠型与非田鼠型鼠疫耶尔森菌的PCR-RFLP方法

作者：郑霄; 夏连续; 海荣; 张志凯; 蔡虹; 尤鑫; 平静; 李伟

来源：中国媒介生物学及控制杂志, 2014, 25(06): 489-491.

• 鼠疫耶尔森菌
• 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性
• 分子分型

目的建立一种快速区分鉴别田鼠型与非田鼠型鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的分子分型方法。方法设计特异引物对93株不同来源、不同生物型鼠疫菌的天冬氨酸酶基因(asp A)进行PCR扩增,用限制性内切酶Hpy CH4Ⅳ对扩增产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析;直接测序法检测asp A基因多态性。结果 asp A基因扩增产物经Hpy CH4Ⅳ酶切后呈现2种基因型:田鼠型鼠疫菌(38株)均为101、126 bp 2个条带;非田鼠型鼠疫菌(55株)均为227 bp单一条带。测序结果证实酶切识别位点发生突变导致带型差异。结论初步建立了鼠疫菌PCR-RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)法asp A基因分型方案,通过Hpy CH4Ⅳ酶切带型差异区分高毒力的非田鼠型菌株与低毒力的田鼠型菌株,适用于疫源地流行病学调查。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 北京市疾病预防控制中心; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所