不同活性的胶原酶对大鼠心肌细胞分离的影响

作者：朱肖星; 牛小麟; 朱萧玲; 陈定章; 周晓东; 陈绍洋; 朱妙章; 王文清

来源：解放军医学杂志, 2008, (09): 1089-1091.

• 肌细胞,心脏
• 胶原酶类
• 存活率
• 心肌收缩

目的研究不同活性的胶原酶对大鼠心肌细胞存活率的影响。方法用4种不同活性的胶原酶以常规酶解法分离成年大鼠心肌细胞,观察分离即刻(D时点)、复钙60min后(E时点)和电刺激10min后(F时点)心肌细胞的存活率,采用IonOptix单细胞动缘检测系统同步检测心肌细胞收缩幅度(ph)、ph占单个心肌细胞长度(bl)的百分比(以ph/bl表示)、心肌细胞收缩速率(+dL/dt)和心肌细胞舒张速率(-dL/dt)等指标。结果观察D、E、F时点心肌细胞存活率,结果表明299U/mg胶原酶的分离效果286U/mg、203U/mg和403U/mg的胶原酶(P<0.05)。D时点4组心肌细胞的存活率没有差别,E、F时点时存活率降低。在心肌细胞收缩/舒张功能的检测中,299U/mg的胶原酶分离效果最佳,203、286、299U/mg和403U/mg组的ph分别是0.13±0.05、0.14±0.06、0.14±0.06μm和0.11±0.05μm;ph/bl分别是8.8%±2.4%、8.9%±2.3%、9.2%±3.5%和7.5%±2.2%;+dL/dt分别是1.8±0.6、1.9±0.6、2.0±0.7μm/s和1.7±0.5μm/s,-dL/dt分别是1.9±0.6、2.0±0.7、2.1±0.6μm/s和1.7±0.6μm/s。结论采用一定范围(203~299U/mg)的胶原酶对心肌细胞进行分离,酶活性越大,消化时间越短,心肌细胞存活率高、收缩/舒张功能好,其中以299U/mg活性的胶原酶效果最好。活性偏高或偏低的胶原酶分离心肌细胞的存活率和收缩/舒张功能均明显降低。

• 单位
  中国人民解放军空军总医院; 第四军医大学; 西京医院; 西安交通大学第二附属医院