检测鸡血清多杀性巴氏杆菌抗体的胶体金试纸条的研制与应用

作者：程龙飞; 陈红梅; 江南松; 傅光华; 傅秋玲; 万春和; 黄瑜^*; 刘荣昌; 施少华

来源：中国预防兽医学报, 2023, 45(04): 374-378.

• 多杀性巴氏杆菌
• 胶体金试纸条
• 重组脂蛋白B

为建立快速检测鸡血清多杀性巴氏杆菌(Pm)抗体的胶体金免疫层析技术，本研究采用胶体金标记兔抗鸡Ig G，制备金标垫，将重组脂蛋白B(rPlpB)和羊抗兔Ig G抗体分别包被于硝酸纤维膜作为检测线和质控线，优化条件后组装成胶体金试纸条(CGTS)。结果显示，胶体金标记兔抗鸡Ig G的最佳p H为8.5，最佳标记浓度为7μg/mL;r PlpB和羊抗兔Ig G抗体的最佳使用浓度均为0.2 mg/m L。利用该方法检测SPF鸡血清，鸡Pm、鸡大肠杆菌、鸡沙门菌、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒阳性血清，结果显示仅鸡Pm阳性血清检测为阳性，其他均为阴性，表明CGTS的特异性强。将琼脂扩散(AGP)效价为1∶16的鸡Pm阳性血清2倍倍比稀释后以CGTS检测，结果显示1∶320倍稀释仍检测为阳性，表明CGTS的敏感性较高。检测鸡Pm阳性血清和SPF鸡血清时，同批次不同试纸条之间、不同批次之间均无差异，表明该方法的重复性好。对89份鸡血清采用CGTS和间接ELISA检测，结果显示，二者阳性符合率为91.5%，阴性符合率为100%，总符合率为94.4%。禽霍乱灭活疫苗免疫后14 d,66.7%的鸡采用该方法能够检出抗体阳性，免疫后21 d，所有鸡均检出抗体阳性。本研究首次基于r PlpB建立了检测鸡血清Pm抗体的CGTS方法，该方法操作简单、特异性强、敏感性高、重复性好，适合在基层推广，为评价禽霍乱疫苗的免疫效果提供了可行技术。

• 单位
  福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心; 福建省禽病防治重点实验室; 福建省农业科学院