Necrostatin-1对TLR4/NF-κB途径的调控在大鼠脑缺血再灌注后小胶质细胞活化中的意义

作者：杨龙; 刘芷含; 张瑞成; 冯宇; 周延龙; 贾潇; 耿德勤; 程言博^*

来源：中风与神经疾病杂志, 2018, 35(12): 1079-1082.

DOI：10.19845/j.cnki.zfysjjbzz.2018.12.006

• Necrostatin-1
• TLR4
• NF-κB
• 炎症反应
• 小胶质细胞

目的本研究拟通过观察Necrostatin-1(Nec-1)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注(I/R)后离子型钙接头蛋白-1(iba-1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB/p)、和白细胞介素-6(IL-6)表达的影响,探讨Nec-1对大鼠I/R后小胶质细胞活化中的意义和可能的脑保护机制。方法 (1)取成年雄性SD大鼠48只,体重(250±10) g,随机分为假手术组(Sham)、手术组(MCAO)、DMSO溶剂对照组(DMSO)、Nec-1干预组(Nec-1),每组再分两个亚组,分别为再灌注6 h、24 h,每组6只。Nec-1干预组于缺血前30 min按640 nmol/kg侧脑室注射Nec-1溶液,DMSO对照组于缺血前30 min侧脑室注射等量10%DMSO溶液。线栓法制备大脑中动脉阻塞缺血再灌注模型,于缺血2 h再灌注6 h和24 h,免疫组织化学染色(IHC)观察小胶质细胞活化标志iba-1的表达和TLR4、NF-κB/p65的定位和表达。(2)另取SD大鼠48只,方法同上,免疫印迹法(WB)检测TLR4、NF-κB/p65、IL-6蛋白的定位和表达。结果 (1)与假手术组相比,手术组TLR4、NF-κB/p65、iba-1的免疫阳性细胞增多,而Nec-1干预组TLR4、NF-κB/p65、iba-1的免疫阳性细胞明显减少;(2)与假手术组相比,WB显示手术组TLR4、NF-κB/p65核转位、IL-6蛋白表达明显增多,Nec-1干预组TLR4、IL-6的蛋白表达明显降低,NF-κB/p65核转位减轻,差异均有统计学意义(P <0. 05);手术组和对照组各指标差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 Nec-1可能通过抑制TLR4/NF-κB途径抑制小胶质细胞的活化,从而减轻炎症反应对脑组织起保护作用。

• 单位
  神经内科; 徐州医科大学