摘要
目的探讨去甲氧基姜黄素(DMC)对人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响。方法将人膀胱癌T24细胞株用含10%胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基培养,并将细胞分为实验组和对照组。实验组细胞加入不同浓度的DMC(10、20、40、80、160μM)进行孵育,对照组加入等体积二甲基亚砜(DMSO)进行孵育。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验检测DMC对T24细胞增殖活力的影响,流式细胞术检测T24细胞凋亡率,Western印迹法检测DMC对T24细胞作用的分子机制。结果实验组用不同浓度的DMC孵育48 h后,细胞增殖活力均低于对照组(P<0.05)。用不同浓度的DMC(20、40、80μM)处理T24细胞48 h,增殖细胞核抗原(PCNA)相对表达量均低于对照组,p27相对表达量均高于对照组(P<0.05);且随DMC浓度的增加PCNA相对表达量逐渐减低,p27相对表达量逐渐增高。不同浓度的DMC(20、40、80μM)处理T24细胞48 h后,细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05);pro-caspase 3、cleaved-caspase 3、pro-PARP、cleaved-PARP的相对表达量与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。用浓度为40μM的DMC分别刺激T24细胞0、15、30、60、120min,采用Western印迹法检测与细胞增殖密切相关的mTOR通路磷酸化的变化显示,不同时间点p-mTOR的相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);且刺激30、60、120 min时的p-mTOR的相对表达量均低于0 min时(P<0.05);而不同时间点mTOR的相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DMC可抑制人膀胱癌T24细胞的增殖,并诱导该细胞凋亡,其分子机制可能与Caspase 3的激活和mTOR通路的抑制有关,对于临床上膀胱癌的治疗有较广阔的应用价值。
-
单位河北医科大学第四医院