摘要
目的:建立抗人紫杉醇的人卵巢癌细胞株(OVCAR3/T)。研究姜黄素逆转对紫杉醇耐药的卵巢癌细胞株(OVCAR3 / T)的作用,并探讨其相关的分子机制。方法:通过紫杉醇浓度梯度递增法诱导构建OVCAR3/T细胞株。MTT法检测OVCAR3/T对紫杉醇的IC50;比较耐药细胞和敏感细胞的细胞形态、自噬相关基因及蛋白质;MTT检测不同作用时间、不同浓度姜黄素作用于OVCAR3/T后细胞增殖生长情况;平板克隆实验检测OVCAR3/T细胞集落形成能力;RT-qPCR分析自噬相关基因的mRNA表达情况;Western blot检测自噬相关蛋白的表达情况。结果:成功构建出对紫杉醇耐药的人卵巢癌细胞株OVCAR3/T(耐药株指数为6.87);OVCAR3/T细胞形态不规则,集落形成能力减弱,自噬增加;姜黄素呈时间、浓度梯度抑制耐药细胞生长;姜黄素处理后的耐药细胞自噬呈剂量依赖性降低,且使耐药细胞对紫杉醇重新敏感。结论:姜黄素能有效逆转OVCAR3/T细胞耐药,且这可能与抑制细胞自噬相关,姜黄素有望成为逆转卵巢癌耐药的抗肿瘤药物。
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单位中南大学; 中南大学湘雅医学院; 基础医学院