PPAR-γ介导FAK在肺动脉平滑肌细胞迁移调控中的机制研究

作者：张德信^*; 胡劲松; 李少军; 张永红; 王珂; 李满祥

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(09): 1262-1266.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.09.015

• 肺动脉平滑肌细胞
• 黏着斑激酶
• 过氧化物酶增生物激活受体

目的研究PPAR-γ、PDGF-βR及FAK在肺动脉平滑肌细胞迁移中的分子调控机制。方法分离大鼠肺动脉平滑肌细胞,培养至3-7代细胞用于实验。分为4组,CON组:常规培养细胞; PDGF-BB组:细胞同步化后加入PDGF-BB(20 ng/ml),刺激1 h后裂解细胞; Y15组:细胞同步化后加入PDGF-BB(20 ng/ml)预刺激1 h,再加入FAK抑制剂Y15(10μmol/L)刺激2 h后裂解细胞; ROSI组:细胞同步化后加入罗格列酮(10μmol/L)刺激1 h,再加入PDGF-BB刺激1 h后裂解细胞。裂解各组处理细胞,Western blot检测各组p-PDGF-βR、p-FAK(Tyr397)水平;划痕实验及Transwell方法比较细胞迁移能力。结果PDGF-BB组细胞迁移能力较CON组明显增强(77. 3%±4. 2%vs 61. 3%±3. 5%,P <0. 05),p-PDGF-βR、p-FAK(Tyr397)水平提高(2. 2±0. 12 vs 0. 93±0. 11; 1. 07±0. 08 vs 0. 39±0. 02,P <0. 05)。Y15组细胞迁移能力较PDGF-BB组明显降低(72. 7%±4. 7%vs 77. 3%±4. 2%,P <0. 05),p-PDGF-βR无明显变化(2. 0±0. 10 vs 2. 2±0. 12,P> 0. 05),p-FAK(Tyr397)水平降低(0. 48±0. 09 vs 1. 07±0. 08,P <0. 05)。ROSI组细胞迁移能力较Y15组差异无统计学意义(75. 3%±4. 04%vs 72. 7%±4. 70%,P> 0. 05),p-PDGF-βR水平降低(1. 25±0. 10 vs 2. 0±0. 10,P <0. 05); p-FAK(Tyr397)水平提高(0. 52±0. 07 vs 0. 48±0. 09,P <0. 05);而与PDGF-BB组比较,ROSI组细胞迁移能力(77. 3%±4. 2%vs 75. 3%±4. 04%)及p-PDGF-βR(2. 2±0. 12 vs 1. 25±0. 10)、p-FAK(Tyr397)水平(1. 07±0. 08 vs 0. 52±0. 07)均显著降低(P <0. 05)。Transwell迁移小室实验结果同划痕实验结果。结论 PPAR-γ/PDGF-βR/FAK(Tyr397)通路,可能是抑制肺动脉平滑肌细胞迁移机制之一。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院; 西安交通大学第二附属医院; 西安交通大学