一种高效检测致病性钩端螺旋体PCR改良方法及效果评价

作者：王蓉; 马敏; 王忠发; 刘吉洛^*

来源：中国媒介生物学及控制杂志, 2023, 34(01): 77-81.

• 钩端螺旋体
• 聚合酶链式反应
• 16S rRNA

目的 比较评价1种致病性钩端螺旋体（钩体）的聚合酶链式反应（PCR）改良方法与3种现行标准方法的检测效果，用于病人早期诊断与宿主动物监测。方法 对《全国病媒生物病原学监测方案（试行）》推荐致病性钩体检测方法（方法 3）增加一步反转录反应过程，不改变引物和探针，形成改良方法（方法 4）。分别采用方法 4、卫生行业标准推荐方法（方法 1）、检验检疫行业标准推荐方法（方法 2）和方法 3,4种PCR方法平行检测不同稀释度的钩体阳性标本、病人早期血清及鼠肾标本，评价其检测效果。结果 方法 4的灵敏度分别是方法 1、2、3的10 000、10 000及1 000倍。仅有方法 4能在病人早期血清中检出钩体核酸。4种方法对于100份鼠肾标本中的钩体检出率分别是2.00%、4.00%、8.00%和40.00%。方法 4与方法 1、2、3的阳性检出率差异有统计学意义（均P<0.001），方法 1、2、3之间的阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 获得的改良方法对钩体病人早期血清和鼠肾标本的核酸检测效果，均明显优于其他3种现行标准检测方法。

• 单位
  宁波市疾病预防控制中心; 中国人民解放军第二军医大学