c-FLIP调节TRAIL诱导胃癌细胞凋亡敏感性的研究

作者：蔡军; 尹杰; 郑智; 张军

来源：临床和实验医学杂志, 2015, 14(23): 1958-1963.

DOI：10.3969/j.issn.1671-4695.2015.23.011

• 胃癌细胞
• 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
• c-FLIP
• 细胞凋亡
• 敏感性

目的探讨凋亡抑制蛋白c-FLIP对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导胃癌细胞SGC7901凋亡的影响。方法采用RNAi技术干扰c-FLIP的表达,MTT法测定细胞活力、采用Hoechst 33258染色及流式细胞仪检测细胞凋亡,定量PCR和Western blot法检测c-FLIP,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)的表达。结果特异性的RNAi能够显著抑制c-FLIP mRNA和蛋白的表达。单独使用不同浓度TRAIL处理SGC7901细胞24 h后,发现细胞的存活率有所降低,但没有显著差异。在干扰c-FLIP表达的同时用TRAIL 100 ng/ml作用胃癌细胞SGC7901不同时间(6 h,12 h,24 h),发现作用24 h后,细胞的存活率为对照组的62.8%,显著降低(P<0.05),而处理后不同时间的对照组细胞存活率无显著差异(P>0.05)。凋亡实验显示在二者共同作用SGC7901细胞24 h后,能够促进细胞的凋亡。Western blot结果显示二者共同作用24 h后,c-FLIP显著降低、caspase-8及激活型caspase-8(p-18)的表达均显著升高。结论抑制c-FLIP的表达增强了TRAIL诱导胃癌细胞SGC7901的凋亡。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院