黔产苦参ISSR-PCR反应体系正交优化研究

作者：金燕; 龙庆德; 常楚瑞; 陆平祝; 王晓丽

来源：安徽农业科学, 2016, 44(16): 114-116.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.16.036

• 苦参
• CTAB
• ISSR-PCR反应体系
• 正交设计

[目的]确定适合苦参稳定的ISSR-PCR反应体系。[方法]采用经典的CTAB法提取苦参新鲜幼嫩叶片DNA;针对Mg2+、d NTPs、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶进行正交设计L16(45),优化黔产苦参ISSR-PCR反应体系。[结果]最适ISSR-PCR反应体系为:模板DNA 90 ng、0.4μmol/L引物、2.0 mmol/L Mg2+、TaqDNA聚合酶0.5 U、0.5 mmol/L d NTPs。[结论]建立的苦参ISSR-PCR反应体系,经过19份苦参样品检验,证明该体系稳定可靠,可用于苦参遗传多样性分析。

• 单位
  贵州医科大学