山东省副猪嗜血杆菌分子流行病学调查及其外膜蛋白P2基因的表达纯化

作者：杨杰; 李建达; 曾昊; 任素芳; 郭立辉; 孙文博; 陈智; 丛晓燕; 于江^*; 吴家强^*

来源：中国动物传染病学报, 2018, 26(05): 40-47.

• 副猪嗜血杆菌
• 流行病学
• ompP2基因
• 表达
• 纯化

根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白(outer membrane proteins,Omp)P2基因序列(GenBank登录号:FJ685754.1)设计引物,对2015～2016年在山东省不同地区采集的225份病料进行PCR扩增和遗传演化分析,结果发现2015年和2016年Hps检出阳性率分别为7.63%、7.48%,细菌分离确定225份样品中17份为阳性;Hps菌株之间的氨基酸同源性在86.7%～99.7%,同源性较高的蛋白具有交叉反应性。构建Hps omp P2基因原核表达载体,确定OmpP2蛋白的最佳诱导温度,通过亲和层析Ni-IDA树脂纯化,获得高纯度的OmpP2蛋白,Western blot确定纯化的OmpP2蛋白与不同血清型的Hps阳性血清均存在良好的反应原性。本研究为进一步探索Hps OmpP2的生物学特性及对副猪嗜血杆菌病的血清学诊断、亚单位疫苗的开发奠定了基础。

• 单位
  山东省农业科学院; 山东师范大学; 生命科学学院